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The Lymphocyte Subsets

(1)    應用CD3/CD19區分T淋巴細胞和B淋巴細胞

CD3是T細胞的特異性抗原，CD19則用來識別B細胞．因此應用CD3/CD19雙標試劑即可以區分和鑒定T淋巴細胞和B淋巴細胞亞群；CD3、CD19陽性表達為獨立的陽性細胞群體。如出現雙陽性細胞均為假象。這樣就可不用同型對照來設定陰性或陽性界線。此外，此檢測還會出現雙陰性群體，這些都是NK細胞，這些細胞也提供了雙陰性群體的對照。

(2) 應用CD3/CD4來鑒定CD4+T細胞

首先用CD3來區分全部T細胞．而CD3/CD4雙陽性細胞為真正的輔助/誘導性T細胞，這是HIV病毒感染的主要對象;CD3-/CD4+細胞群是由單核細胞組成，這些細胞相對于CD4+和T細胞來說弱表達CD4，在光散射參數的位置分布也較廣。所以CD3/CD4抗體組合能夠完全把CD4陽性輔助/誘導性T細胞區分開。另外，應用適當的雙色組合如CD4與CD29,CD4與CD45RA,也可以測定T輔助細胞的的亞群。如CD4+2H4(CD 45RA)+細胞是Ts的誘導細胞;CD4+ 4B4 (CD29)+細胞Th的誘導細胞。同理,?利用CD8+CD45RA和CD8+CD29+ S6F1可測定T抑制細胞的亞群。T輔助細胞還可分成Th1、Th2兩個亞群，同時標記細胞內細胞因子IFN-γ和IL-4，可區分Th1細胞（CD4+/IFN-γ+）和Th2細胞（CD4+/IL-4+）。

（3）應用CD3/CD8鑒定CD8+T淋巴細胞

CD8的表達不只限于細胞毒性T細胞，此抗原在部分的NK細胞上也能檢測到。所以利用CD3抗體才能把該細胞亞群分開。
若采用三色測定可給出更為準確的各亞群的情況:如真正的T輔助細胞應是CD3+ CD4+CD8-,真正的T抑制細胞應是CD3+CD4- CD8+,單標CD8+細胞中不僅有T抑制細胞,還含有30%左右的NK細胞;而CD3+CD4-CD8-細胞群是γδT細胞,此類細胞與感染有關．CD3+CD4+ CD8-細胞+CD3+CD4-CD8+細胞+CD3+CD4-CD8-細胞+CD3+CD4+CD8+細胞=CD3+細胞。

(4)  自然殺傷細胞（NK）的檢測

①CD16(FcRⅢ)表達于大多數NK細胞上，但也表達于中性粒細胞，此抗原NK細胞的表達比較弱，并在NK細胞活化時丟失；②CD56表達于大多數NK細胞上，也表達于一些T淋巴細胞，與CD3聯合使用可以區分CD3+/CD56+T淋巴細胞和CD3-/CD56+NK細胞。③聯合使用3種抗體最完全地鑒定所有的NK細胞。NK細胞或表達CD16，或表達CD56，但它們不表達CD3。CD16和CD56聯合使用，根據熒光強度可將NK細胞從雙陰性細胞中區分出來。這樣運用該試劑組合，NK細胞可形成獨立的群體與其它細胞相區分。

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